Bilirubiinijauhe CAS 635-65-4uutetaan pääasiassa sapesta. Bilirubiini ei liukene veteen, liukenee orgaanisiin liuottimiin, kuten bentseeniin, kloroformiin ja hiilidisulfidiin, ja liukenee hieman etanoliin ja eetteriin. Bilirubiini voidaan myös liuottaa kuumaan etanolin ja kloroformin seokseen. Bilirubiinin natriumsuola liukenee helposti veteen, mutta sen kalsium-, magnesium- ja bariumsuolat ovat veteen liukenemattomia. Bilirubiini on monokliininen kide, jonka väri on vaalean oranssi tai syvän punaruskea. Sen kuiva kiinteä aine on suhteellisen stabiili, ja kloroformiliuos on myös suhteellisen stabiili pimeässä. Se on epästabiili emäksisessä liuoksessa (kuten 0,1 mmol/l natriumhydroksidissa) tai kun se kohtaa kolmenarvoisia rauta-ioneja, ja hapettuu nopeasti biliverdiiniksi. Bilirubiini voi sitoutua glysiiniin, alaniiniin tai histidiiniin. Seerumiproteiinin, vitamiinien tai EDTA:n lisääminen voi stabiloida bilirubiinia.
1. Kalsiumsuolan valmistus kalsiumsuolan epäsuoralla uuttomenetelmällä: lisää 3-3,5 kertaa kyllästettyä kalkkiveden supernatanttia tuoreeseen sian sappeen samalla sekoittaen ja jatka sitten sekoittamista 5-10min, Ph{ {4}}, poista vaahto kuumennettaessa 50 asteeseen sideharsolla, jatka kuumennusta kiehuvaksi, pidä 2 minuuttia, jäähdytä, suodata ja hanki kalsiumsuola. Lopputuotteen bilirubiinin valmistaminen: Ota kalsiumsuola ja lisää 0,8-kertainen määrä vettä tahnaksi, siivilöi se 30-40-verkon läpi, lisää suodokseen 0,3 % antioksidanttia, lisää suolaa ja happoa. pH säädetään arvoon 1,5, anna seistä 4 tuntia, suodata, lisää suodatinkakkuun 8-10-kertainen määrä 80 % etanolia, murskaa ja sekoita hyvin, lisää antioksidantti, anna seistä yön yli ja saa saostua. Lisää 4-6 kertaa vähintään 80 % etanolia ja antioksidanttia, sekoita ja liota yön yli. Toista tämä prosessi 3-4 kertaa ja kuivaa sakka alle 70 asteen lämpötilassa lopullisen bilirubiinituotteen saamiseksi.
Kalsiumsuolasaostus [HCl, raskas natriumsulfiitti] → saostus [etanoli, raskas natriumsulfiitti] → saostus [70 astetta] → bilirubiinituote.
2. Kalsiumbilirubinaatin valmistus kloroformiuuttomenetelmällä: Tuoreen sian sapen pH säädetään arvoon 12 natriumhydroksidilla, kuumennetaan kiehuvaksi, lisätään kalsiumkloridiliuosta, kuumennetaan sitten kiehuvaksi, jäähdytetään, suodatetaan kalsiumbilirubinaatin saamiseksi. Sian sappi [NaOH, CaCl2] → [pH 12, 100 astetta ] Bilirubiinijauheen valmistus CAS 635-65-4 kalsiumsuolan bilirubiinin lopputuote: bilirubiinin kalsiumsuola säädetään pH-arvoon 1-2 1:1 suolahapolla, hapan vesi valutetaan pois, kloroformi uutetaan kloroformilla, pestään vedettömällä etanolilla ja liuos jätetään noin 5 asteessa lopullisen bilirubiinituotteen saamiseksi.
Bilirubiinikalsiumsuola [HCl] → [pH1-2] happoyhdiste [kloroformi, vedetön etanoli] → [5 astetta ] bilirubiinin lopputuote
3. Parannettu kalsiumsuolamenetelmä kalsiumsuolan happamoittamiseksi: Ota tuore sian sappi ja lisää 1 % kalsiumhydroksidia, sekoita hyvin, kuumenna nopeasti 90-97 asteeseen, pidä lämpimänä 10 minuuttia ja suodata. kalsiumsuola. Kuumentaminen 40 asteeseen aiheuttaa rasvan muodostumista, joka voidaan poistaa varovasti. Saatu kalsiumsuola voidaan pestä kerran kuumalla vedellä ylimääräisen alkalin ja muiden epäpuhtauksien poistamiseksi. Ota kalsiumsuola ja lisää yli 10-kertainen määrä vettä, jotta se jakautuu tasaisesti. Lisää 1 % antioksidanttia ja sekoita (60 r/min) lisätäksesi 1:2 suolahappoa tipoittain. Saavuta pH 2,0 40 minuutin kuluessa ja odota, kunnes pH pysyy muuttumattomana, jotta saadaan hapan aine. Sian sappi [1 % kalsiumhydroksidia] → [90-97 aste , 15 min] Sappikalsiumsuola [antioksidantti, kloorivetyhappo] → [pH2,40min] Hapan alkoholipesu, vesipesu: Hapan bilirubiini dispergoituu tasaisesti huoneenlämpötilassa 10-kertaisella etanolimäärällä pH ei saa olla korkeampi kuin 5, lisätään 0,5 % antioksidanttia, sekoitetaan ja jätetään noin 1 tunniksi kerrostumista varten. Mene alkoholiliuoksen ylempään kerrokseen ja kerää saostunut bilirubiini. Pese bilirubiinia 50 asteen lämpimällä vedellä noin 5 minuuttia, kerää kelluva bilirubiini, lisää nopeasti etanolia dehydraatiota varten ja poista etanoli raakabilirubiinin saamiseksi. Hapan yhdiste [etanoli] → [1 h] saosta bilirubiinia [50 astetta kuumaa vettä] → [etanoli] raakabilirubiinin uuttaminen, haihdutus, kiteyttäminen ja kuivaus: Ota raakabilirubiini ja lisää 10 kertaa kloroformia ravistaaksesi 50 asteessa 10 minuuttia. Uuta tarvittaessa 2-3 kertaa, ja jäännöksen tulee olla valkoista. Kloroformiuute alistettiin tyhjötislaukseen, kunnes se oli lähes kuiva, mikä johti useimpien bilirubiinikiteiden muodostumiseen. Huoneenlämpötilaan jäähdyttämisen jälkeen lisättiin etanolia ja jäähdytettiin edelleen 4 asteeseen 10 minuutiksi. Bilirubiinikiteet suodatettiin ja käsiteltiin vedettömällä etanolilla tai eetterillä, mitä seurasi tyhjiökuivaus korkealaatuisen bilirubiinin saamiseksi.
Raakabilirubiini [kloroformi] → [10 min] kloroformiliuos [kiteytys] → korkealaatuinen bilirubiini
4. Hydrolyysiliuoksen valmistus ioninvaihtohartsiuuttomenetelmällä: Ota tuore lehmän sappi, suodata se sideharsolla, lisää 2 mol/l natriumhydroksidiliuosta pH:n säätämiseksi arvoon 10 samalla sekoittaen, kiehauta ja suodata hydrolysaatin saamiseksi.
Sappihapon adsorptio ja eluointi hydrolyysiliuoshartsikolonnilla: Kaada keitetty hydrolyysiliuos esilämmitettyyn hartsikolonniin, kunnes poistoveden väri tummenee ja adsorptio on kyllästynyt.
Lisää kylmää vettä, kunnes lämpötila kolonnin sisällä laskee huoneenlämpötilaan, ja lisää sitten laimeaa natriumbisulfiittihydrokloridiliuosta kolonnin yläosasta, jotta poistoveden pH on 1.
Pese 75-prosenttisella etanolilla, kerää, kun eluentti on tummanvihreä samea liuos, ja pese, kunnes poistovesi kirkastuu ja pH on lähes neutraali. Pese uudelleen 95 % etanolilla.
Kerää etanolieluointiliuos sappihapon valmistamiseksi. Hydrolyysiliuos [ioninvaihtokolonni] → [75 % etanolia, 95 % etanolia] Etanolieluentti bilirubiinin eluointiin, väkevöintiin ja kuivaamiseen: Vapauta kaikki 95 % etanoli kolonnista, liota kloroformissa 10 minuuttia ja kerää kloroformieluentti, kunnes keltainen väri näkyy.
Tislaa kloroformieluentti lähes kuivaksi, lisää vedetöntä etanolia ja jatka talteenottoa, kunnes kloroformia ei enää ole. Suodata kuumana, kerää bilirubiini, kuivaa ja valmista bilirubiinituote.
Yolanda
Matkapuhelin: +86 -29-86107037-8012
Sähköposti:sales9@konochemical.com
Puh/Wechat: 18729555803